TGuide కణాలు/కణజాలం/ప్లాంట్ RNA కిట్

A-1 సెల్ లైసిస్ లేదా సజాతీయత సరిపోదు

---- నమూనా వినియోగాన్ని తగ్గించండి, లైసిస్ బఫర్ మొత్తాన్ని పెంచండి, సజాతీయత మరియు లైసిస్ సమయాన్ని పెంచండి.

A-2 నమూనా మొత్తం చాలా పెద్దది

---- ఉపయోగించిన నమూనా మొత్తాన్ని తగ్గించండి లేదా లైసిస్ బఫర్ మొత్తాన్ని పెంచండి.

A-1 తగినంత సెల్ లైసిస్ లేదా సజాతీయత

---- నమూనా వినియోగాన్ని తగ్గించండి, లైసిస్ బఫర్ మొత్తాన్ని పెంచండి, సజాతీయత మరియు లైసిస్ సమయాన్ని పెంచండి.

A-2 నమూనా మొత్తం చాలా పెద్దది

---- దయచేసి గరిష్ట ప్రాసెసింగ్ సామర్థ్యాన్ని చూడండి.

A-3 RNA కాలమ్ నుండి పూర్తిగా తొలగించబడలేదు

---- RNase-free నీటిని జోడించిన తర్వాత, సెంట్రిఫ్యూజింగ్ ముందు కొన్ని నిమిషాలు అలాగే ఉంచండి.

ఎ -4 లో ఇథనాల్

---- ప్రక్షాళన చేసిన తర్వాత, మళ్లీ సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయండి మరియు వీలైనంత వరకు వాషింగ్ బఫర్‌ను తొలగించండి.

A-5 సెల్ కల్చర్ మాధ్యమం పూర్తిగా తీసివేయబడలేదు

---- కణాలను సేకరించేటప్పుడు, దయచేసి సాధ్యమైనంత వరకు సంస్కృతి మాధ్యమాన్ని తీసివేసేలా చూసుకోండి.

A-6 RNA స్టోర్‌లో నిల్వ చేయబడిన కణాలు సమర్థవంతంగా సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడలేదు

---- RNA స్టోర్ సాంద్రత సగటు సెల్ కల్చర్ మాధ్యమం కంటే ఎక్కువ; కాబట్టి సెంట్రిఫ్యూగల్ ఫోర్స్ పెంచాలి. ఇది 3000x g వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయడానికి సూచించబడింది.

A-7 తక్కువ RNA కంటెంట్ మరియు నమూనాలో సమృద్ధి

---- నమూనా వల్ల తక్కువ దిగుబడి వస్తుందో లేదో తెలుసుకోవడానికి సానుకూల నమూనాను ఉపయోగించండి.

A-1 పదార్థం తాజాగా లేదు

---- వెలికితీత ప్రభావాన్ని నిర్ధారించడానికి తాజా కణజాలాలను వెంటనే ద్రవ నత్రజనిలో నిల్వ చేయాలి లేదా వెంటనే RNAstore రియాజెంట్‌లో ఉంచాలి.

A-2 నమూనా మొత్తం చాలా పెద్దది

---- నమూనా మొత్తాన్ని తగ్గించండి.

A-3 RNase కలుషితంn

---- కిట్‌లో అందించిన బఫర్‌లో RNase లేనప్పటికీ, వెలికితీత ప్రక్రియలో RNase ని కలుషితం చేయడం సులభం మరియు జాగ్రత్తగా నిర్వహించాలి.

A-4 ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కాలుష్యం

---- ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్‌ను రీప్లేస్ చేయండి మరియు వినియోగ వస్తువులు మరియు లోడింగ్ బఫర్ RNase కాలుష్యం లేకుండా ఉండేలా చూసుకోండి.

A-5 ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కోసం చాలా ఎక్కువ లోడింగ్

---- నమూనా లోడింగ్ మొత్తాన్ని తగ్గించండి, ప్రతి బావి యొక్క లోడింగ్ 2 μg మించకూడదు.

A-1 నమూనా మొత్తం చాలా పెద్దది

---- నమూనా మొత్తాన్ని తగ్గించండి.

A-2 కొన్ని నమూనాలలో అధిక DNA కంటెంట్ ఉంటుంది మరియు DNase తో చికిత్స చేయవచ్చు.

---- పొందిన RNA ద్రావణానికి RNase-Free DNase చికిత్సను నిర్వహించండి మరియు చికిత్స తర్వాత తదుపరి ప్రయోగాల కోసం RNA ని నేరుగా ఉపయోగించవచ్చు లేదా RNA శుద్దీకరణ కిట్‌ల ద్వారా మరింత శుద్ధి చేయవచ్చు.

గాజుసామానుల కోసం, 150 ° C వద్ద 4 గం వరకు కాల్చబడుతుంది. ప్లాస్టిక్ కంటైనర్‌ల కోసం, 0.5 M NaOH లో 10 నిమిషాలు ముంచి, తర్వాత RNase లేని నీటితో బాగా కడిగి, ఆపై RNase ని పూర్తిగా తొలగించడానికి స్టెరిలైజ్ చేయండి. ప్రయోగంలో ఉపయోగించిన కారకాలు లేదా పరిష్కారాలు, ముఖ్యంగా నీరు తప్పనిసరిగా RNase లేకుండా ఉండాలి. అన్ని కారకాల సన్నాహాల కోసం RNase లేని నీటిని ఉపయోగించండి (శుభ్రమైన గ్లాస్ బాటిల్‌కు నీరు జోడించండి, DEPC ని 0.1% (V/V) తుది సాంద్రతకు జోడించండి, రాత్రిపూట షేక్ చేయండి మరియు ఆటోక్లేవ్ చేయండి).