TIANcombi DNA Lyse & Det PCR కిట్
లక్షణాలు
■ సరళమైన మరియు వేగవంతమైనది: ద్రవ నత్రజని గ్రౌండింగ్ అవసరం లేకుండా 5 నిమిషాల్లో వివిధ కణజాలాల నుండి DNA తీయబడుతుంది.
Applications విస్తృత అనువర్తనాలు: మొక్కల ఆకులు, విత్తనాలు, జంతువుల కణజాలం, రక్త నమూనాలు (తాజా రక్తం, ప్రతిస్కందకం, రక్తం గడ్డకట్టడం, ఎండిన రక్తపు మచ్చలు మొదలైనవి), ఈస్ట్ మరియు బ్యాక్టీరియాకు వర్తిస్తుంది.
Comp బలమైన అనుకూలత: వివిధ నమూనా మూలాల నుండి సేకరించిన DNA యొక్క విస్తరణకు PCR కారకం అనుకూలంగా ఉంటుంది.
అప్లికేషన్లు
Dete జన్యు గుర్తింపు: పెద్ద-స్థాయి జన్యు గుర్తింపు కోసం ఆదర్శ ఎంపిక.
ముఖ్యమైన గమనికలు
Cotton పత్తి ఆకులు వంటి అధిక స్థాయి ఫినాల్‌లను కలిగి ఉన్న నమూనాల కోసం, నమూనా ఇన్‌పుట్ మొత్తం ఖచ్చితంగా 0.4 mg కంటే తక్కువగా ఉండాలి, లేకుంటే PCR ప్రతిచర్య ప్రభావితమవుతుంది.
అన్ని ఉత్పత్తులను ODM/OEM కోసం అనుకూలీకరించవచ్చు. వివరాల కోసం,దయచేసి అనుకూలీకరించిన సేవ (ODM/OEM) పై క్లిక్ చేయండి
 |
మొక్కజొన్న, గోధుమ, వరి, సోయాబీన్ మరియు పత్తి యొక్క 5 మి.గ్రా ఆకులు మరియు విత్తనాల నుండి DNA సేకరించబడింది. నిర్దిష్ట ప్రైమర్‌లను ఉపయోగించి PCR ద్వారా DNA విస్తరించబడింది. మొత్తం 20 μl ఎల్యూయెంట్‌ల నుండి 6 μl DNA ప్రతి లేన్‌కు లోడ్ చేయబడుతుంది. 1: సానుకూల నియంత్రణ జన్యువు; 2: నమూనాలను వదిలివేయండి; 3: విత్తన నమూనాలు; 4: NTC; 5: D2000 ప్రైమర్‌లు |
 |
M: TIANGEN మార్కర్ D2000; 1: అనుకూల నియంత్రణ; 2-7: ఫిల్టర్ పేపర్‌పై ఎండిన రక్తపు మచ్చల సంఖ్య వరుసగా 1-6; 8: ప్రతికూల నియంత్రణ. ఫిల్టర్ పేపర్ నుండి ఎండిన రక్తపు మచ్చలను వెలికితీత పరీక్షకు మెటీరియల్‌గా తీసుకోవడానికి 3 మిమీ పంచర్ ఉపయోగించబడింది. మొత్తం 20 μl ఎల్యూయెంట్‌ల నుండి 6 μl DNA ప్రతి లేన్‌కు లోడ్ చేయబడుతుంది. |
 |
M: TIANGEN మార్కర్ D2000; 1: సానుకూల నియంత్రణ (జన్యుసంబంధమైన DNA టెంప్లేట్‌గా ఉపయోగించబడింది); 2-7: జోడించిన రక్తం మొత్తం వరుసగా 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl మరియు 60 μl; 8-13: జోడించిన రక్తం మొత్తం వరుసగా 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl మరియు 60 μl; 14: NTC. మొత్తం 20 μl ఎల్యూయెంట్‌ల నుండి 6 μl DNA అగరోస్ జెల్‌పై లోడ్ చేయబడింది. |
A-1 మూస
Temp టెంప్లేట్‌లో ప్రోటీన్ మలినాలు లేదా టాక్ ఇన్హిబిటర్‌లు మొదలైనవి ఉన్నాయి ——— DNA టెంప్లేట్‌ను శుద్ధి చేయండి, ప్రోటీన్ మలినాలను తొలగించండి లేదా టెంప్లేట్ DNA ని శుద్ధి కిట్‌లతో తీయండి.
Temp టెంప్లేట్ డీనాటరేషన్ పూర్తి కాలేదు —— డీనాటరేషన్ ఉష్ణోగ్రతని తగిన విధంగా పెంచండి మరియు డీనాటరేషన్ సమయాన్ని పొడిగించండి.
Mp మూస అధోకరణం ——టెంప్లేట్‌ను మళ్లీ సిద్ధం చేయండి.
A-2 ప్రైమర్
Pri ప్రైమర్‌ల నాణ్యత తక్కువగా ఉంది —— ప్రైమర్‌ను రీ-సింథసైజ్ చేయండి.
Mer ప్రైమర్ క్షీణత —— సంరక్షణ కోసం అధిక సాంద్రత గల ప్రైమర్‌లను చిన్న వాల్యూమ్‌గా మార్చండి. బహుళ గడ్డకట్టడం మరియు కరిగించడం లేదా దీర్ఘకాలిక 4 ° C క్రియోప్రెజర్డ్‌ను నివారించండి.
Pri ప్రైమర్‌ల యొక్క సరికాని డిజైన్ (ఉదా. ప్రైమర్ పొడవు సరిపోదు, ప్రైమర్‌ల మధ్య డైమర్ ఏర్పడుతుంది, మొదలైనవి) -రీడిజైన్ ప్రైమర్‌లు (ప్రైమర్ డైమర్ మరియు సెకండరీ స్ట్రక్చర్ ఏర్పడకుండా ఉండండి)
A-3 Mg2+ఏకాగ్రత
G Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా తక్కువ —— Mg ని సరిగ్గా పెంచండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.
A-4 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత
An అధిక ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత ప్రైమర్ మరియు టెంప్లేట్ యొక్క బైండింగ్‌ను ప్రభావితం చేస్తుంది. —— ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను తగ్గించండి మరియు 2 ° C ప్రవణతతో పరిస్థితిని ఆప్టిమైజ్ చేయండి.
A-5 పొడిగింపు సమయం
Extension చిన్న పొడిగింపు సమయం —— పొడిగింపు సమయాన్ని పెంచండి.
దృగ్విషయం: ప్రతికూల నమూనాలు కూడా లక్ష్య శ్రేణి బ్యాండ్‌లను చూపుతాయి.
A-1 PCR కాలుష్యం
Target టార్గెట్ సీక్వెన్స్ లేదా యాంప్లిఫికేషన్ ప్రొడక్ట్స్ యొక్క క్రాస్ కాలుష్యం —— నెగటివ్ శాంపిల్‌లో టార్గెట్ సీక్వెన్స్ ఉన్న శాంపిల్‌ని జాగ్రత్తగా పైప్ చేయవద్దు లేదా సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్ నుండి బయటకు పోయకూడదు. ఇప్పటికే ఉన్న న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను తొలగించడానికి కారకాలు లేదా పరికరాలు ఆటోక్లేవ్ చేయబడాలి మరియు ప్రతికూల నియంత్రణ ప్రయోగాల ద్వారా కాలుష్యం ఉనికిని గుర్తించాలి.
Ag కారక కాలుష్యం —— కారకాలను అరికట్టండి మరియు తక్కువ ఉష్ణోగ్రత వద్ద నిల్వ చేయండి.
A-2 ప్రైమ్r
G Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా తక్కువ —— Mg ని సరిగ్గా పెంచండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.
Pri సరికాని ప్రైమర్ డిజైన్, మరియు టార్గెట్ సీక్వెన్స్‌లో టార్గెట్ కాని సీక్వెన్స్‌తో హోమోలజీ ఉంటుంది. —— రీ-డిజైన్ ప్రైమర్‌లు.
దృగ్విషయం: పిసిఆర్ యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు ఆశించిన పరిమాణంతో పెద్దవిగా లేదా చిన్నవిగా లేదా కొన్నిసార్లు నిర్దిష్ట యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు మరియు నాన్-స్పెసిఫిక్ యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు ఏర్పడతాయి.
A-1 ప్రైమర్
Pri పేలవమైన ప్రైమర్ నిర్దిష్టత
—— రీ-డిజైన్ ప్రైమర్.
Mer ప్రైమర్ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— డీనాటరేషన్ ఉష్ణోగ్రతని సరిగ్గా పెంచండి మరియు డీనాటరేషన్ సమయాన్ని పొడిగించండి.
A-2 Mg2+ ఏకాగ్రత
Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— Mg2+ ఏకాగ్రతను సరిగ్గా తగ్గించండి: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.
A-3 థర్మోస్టేబుల్ పాలిమరేస్
En అధిక ఎంజైమ్ మొత్తం —— 0.5 U యొక్క వ్యవధిలో ఎంజైమ్ మొత్తాన్ని తగిన విధంగా తగ్గించండి.
A-4 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత
Ne ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత చాలా తక్కువగా ఉంది ——అనేలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను సముచితంగా పెంచండి లేదా రెండు-దశల ఎనియలింగ్ పద్ధతిని అవలంబించండి
A-5 PCR చక్రాలు
P చాలా ఎక్కువ PCR చక్రాలు —— PCR చక్రాల సంఖ్యను తగ్గించండి.
A-1 ప్రైమర్——Por ప్రత్యేకత —— ప్రైమర్‌ని రీ-డిజైన్ చేయండి, ప్రైమర్ యొక్క విశిష్టతను పెంచడానికి ప్రైమర్ యొక్క స్థానం మరియు పొడవును మార్చండి; లేదా సమూహ PCR నిర్వహించండి.
A-2 మూస DNA
—— టెంప్లేట్ స్వచ్ఛమైనది కాదు —— టెంప్లేట్‌ను శుద్ధి చేయండి లేదా డిఎన్‌ఎను ప్యూరిఫికేషన్ కిట్‌లతో సేకరించండి.
A-3 Mg2+ ఏకాగ్రత
——Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— Mg ని సరిగ్గా తగ్గించండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.
A-4 dNTP
—— dNTP ల సాంద్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— dNTP గాఢతను తగిన విధంగా తగ్గించండి
A-5 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత
—— చాలా తక్కువ ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత ——అనేలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను తగిన విధంగా పెంచండి
A-6 సైకిల్స్
—— చాలా చక్రాలు —— చక్రం సంఖ్యను ఆప్టిమైజ్ చేయండి
మొదటి దశ తగిన పాలిమరేస్‌ని ఎంచుకోవడం. రెగ్యులర్ టాక్ పాలిమరేస్ 3'-5 'ఎక్సోన్యూకలీస్ కార్యాచరణ లేకపోవడం వల్ల ప్రూఫ్ రీడ్ చేయబడదు, మరియు అసమతుల్యత శకలాల పొడిగింపు సామర్థ్యాన్ని బాగా తగ్గిస్తుంది. అందువల్ల, రెగ్యులర్ టాక్ పాలిమరేస్ 5 kb కంటే పెద్ద లక్ష్య శకలాలను సమర్థవంతంగా విస్తరించదు. పొడిగింపు సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరచడానికి మరియు పొడవైన శకలం విస్తరణ అవసరాలను తీర్చడానికి ప్రత్యేక సవరణ లేదా ఇతర అధిక విశ్వసనీయత కలిగిన పాలిమరేస్‌తో టాక్ పాలిమరేస్‌ను ఎంచుకోవాలి. అదనంగా, పొడవైన శకలాలు విస్తరణకు కూడా ప్రైమర్ డిజైన్, డీనాటరేషన్ సమయం, ఎక్స్‌టెన్షన్ టైమ్, బఫర్ పిహెచ్, మొదలైన వాటికి సర్దుబాటు అవసరం. సాధారణంగా, 18-24 బిపి ఉన్న ప్రైమర్‌లు మెరుగైన దిగుబడికి దారితీస్తాయి. టెంప్లేట్ నష్టాన్ని నివారించడానికి, 94 ° C వద్ద డీనాటరేషన్ సమయం 30 సెకనులకు లేదా ప్రతి చక్రానికి తక్కువగా తగ్గించబడాలి మరియు విస్తరణకు ముందు ఉష్ణోగ్రత 94 ° C కి పెరిగే సమయం 1 నిమిషం కన్నా తక్కువ ఉండాలి. అంతేకాకుండా, పొడిగింపు ఉష్ణోగ్రతను సుమారు 68 ° C వద్ద సెట్ చేయడం మరియు 1 kb/min రేటు ప్రకారం పొడిగింపు సమయాన్ని రూపొందించడం వలన పొడవాటి శకలాలు సమర్థవంతంగా విస్తరించడాన్ని నిర్ధారించవచ్చు.
అధిక విశ్వసనీయత కలిగిన వివిధ DNA పాలిమరేస్‌లను ఉపయోగించడం ద్వారా PCR యాంప్లిఫికేషన్ యొక్క లోపం రేటును తగ్గించవచ్చు. ఇప్పటివరకు కనుగొనబడిన అన్ని టాక్ DNA పాలిమరేస్‌లలో, Pfu ఎంజైమ్ తక్కువ లోపం రేటు మరియు అత్యధిక విశ్వసనీయతను కలిగి ఉంది (జోడించిన పట్టిక చూడండి). ఎంజైమ్ ఎంపికతో పాటు, బఫర్ కూర్పును ఆప్టిమైజ్ చేయడం, థర్మోస్టేబుల్ పాలిమరేస్ ఏకాగ్రత మరియు PCR సైకిల్ నంబర్‌ను ఆప్టిమైజ్ చేయడం వంటి ప్రతిచర్య పరిస్థితులను ఆప్టిమైజ్ చేయడం ద్వారా పరిశోధకులు PCR మ్యుటేషన్ రేటును మరింత తగ్గించవచ్చు.
ఉత్పత్తుల వర్గాలు
మమ్మల్ని ఎందుకు ఎంచుకున్నావు
ఇది స్థాపించబడినప్పటి నుండి, మా ఫ్యాక్టరీ సూత్రానికి కట్టుబడి మొదటి ప్రపంచ స్థాయి ఉత్పత్తులను అభివృద్ధి చేస్తోంది
మొదటి నాణ్యత. మా ఉత్పత్తులు పరిశ్రమలో అద్భుతమైన ఖ్యాతిని పొందాయి మరియు కొత్త మరియు పాత కస్టమర్‌ల మధ్య విలువైన విశ్వసనీయతను పొందాయి.
- టెల్: +86 010-59822688
- బిల్డింగ్ 5, నం. 86, షువాంగింగ్ వెస్ట్ రోడ్, చాంగ్పింగ్ జిల్లా, బీజింగ్.
- people@tiangen.com
