అల్ట్రా హైఫిడెలిటీ పిసిఆర్ కిట్

అధిక విశ్వసనీయత, అధిక విశిష్టత మరియు అధిక సామర్థ్యం హాట్-స్టార్ట్ PCR ప్రీమిక్స్.

అల్ట్రా హైఫిడెలిటీ పిసిఆర్ కిట్ అనేది పిసిఆర్-సంబంధిత క్లోనింగ్ మరియు డిటెక్షన్ కోసం సరిపోయే కొత్త హై-ఫిడిలిటీ పిసిఆర్ యాంప్లిఫికేషన్ ప్రీమిక్స్. కిట్‌లో ఉన్న అల్ట్రా హైఫై DNA పాలిమరేస్ అనేది డైరెక్ట్ మాలిక్యులర్ ఎవల్యూషన్ టెక్నాలజీ ద్వారా అభివృద్ధి చేయబడిన కొత్త వేగవంతమైన మరియు అధిక విశ్వసనీయత కలిగిన DNA పాలిమరేస్. ఇది టెంప్లేట్‌లకు DNA పాలిమరేస్ యొక్క అనుబంధాన్ని పెంచుతుంది, ఎంజైమ్ యొక్క విస్తరణ వేగం మరియు పొడిగింపు సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరుస్తుంది మరియు PCR మరియు ఉత్పత్తి దిగుబడి యొక్క విజయ రేటును పెంచుతుంది.

పిల్లి. లేదు ప్యాకింగ్ సైజు
4992970 1 మి.లీ
4992971 5*1 మి.లీ
4992978 5*5*1 మి.లీ

 

 


ఉత్పత్తి వివరాలు

ప్రయోగాత్మక ఉదాహరణ

ఎఫ్ ఎ క్యూ

ఉత్పత్తి ట్యాగ్‌లు

లక్షణాలు

Operate ఆపరేట్ చేయడం సులభం: ఈ కిట్ 2 × ప్రీమిక్స్‌గా సరఫరా చేయబడుతుంది మరియు కేవలం టెంప్లేట్‌లు మరియు ప్రైమర్‌లను జోడించడం ద్వారా PCR చేయవచ్చు.
F అధిక విశ్వసనీయత: విశ్వసనీయత టాక్ పాలిమరేస్ కంటే 50 రెట్లు ఎక్కువ.
Specific అధిక విశిష్టత: ఉత్పత్తి నిర్దిష్టతను నిర్ధారించడానికి అద్భుతమైన హాట్-స్టార్ట్ పనితీరు ..
Amp వేగవంతమైన యాంప్లిఫికేషన్: పొడిగింపు వేగం 10-15 క్షణ/kb కి చేరుకుంటుంది.
Ex బలమైన విస్తరణ: 20 kb వరకు DNA శకలాలు విస్తరించబడతాయి.
Applic విస్తృత దరఖాస్తు

స్పెసిఫికేషన్

రకం: అధిక విశ్వసనీయత DNA పాలిమరేస్
విస్తరణ వేగం: 10-15 క్షణ/kb
శకలం పరిమాణం: <20kb
అనువర్తనాలు: అధిక విశ్వసనీయత PCR యాంప్లిఫికేషన్, జన్యు క్లోనింగ్, అధిక GC టెంప్లేట్ యాంప్లిఫికేషన్, సంక్లిష్ట జన్యువుల జన్యు క్లోనింగ్, cDNA అధిక విశ్వసనీయత విస్తరణ, SNP గుర్తింపు, సైట్-నిర్దిష్ట మ్యుటేషన్ మొదలైనవి.
వివిధ మొక్కల కణజాలాల నుండి DNA వెలికితీత దిగుబడి:
గమనిక: DNA దిగుబడి నమూనా రకాలపై ఆధారపడి ఉంటుంది. పై పదార్థాలన్నీ లేత ఆకుల నుండి వచ్చినవి.

అన్ని ఉత్పత్తులను ODM/OEM కోసం అనుకూలీకరించవచ్చు. వివరాల కోసం,దయచేసి అనుకూలీకరించిన సేవ (ODM/OEM) పై క్లిక్ చేయండి


  • మునుపటి:
  • తరువాత:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example ఉత్పత్తి నిర్దిష్టతను నిర్ధారించడానికి హాట్-స్టార్ట్
    చిత్రం 1. యాంప్లిఫికేషన్ ఉత్పత్తుల ప్రత్యేకతను నిర్ధారించడానికి అల్ట్రా హైఫై అద్భుతమైన హాట్-స్టార్ట్ ఫంక్షన్‌ను కలిగి ఉంది. మాలిక్యులర్ బీకాన్స్ పద్ధతి వర్తించబడింది (మా మరియు ఇతరులు, అనల్ బయోకెమ్, 2006).
    Experimental Example అద్భుతమైన అధిక విశ్వసనీయత, టాక్ పాలిమరేస్ కంటే 50 రెట్లు ఎక్కువ
    చిత్రం 2. అల్ట్రా హైఫై యొక్క విశ్వసనీయత సాధారణ టాక్ పాలిమరేస్ కంటే 50 రెట్లు ఎక్కువ. టాక్ పాలిమరేస్ (దిద్దుబాటు కార్యకలాపాలు లేకుండా) యొక్క పాలిమరైజేషన్ విశ్వసనీయత సూచనగా ఉపయోగించబడుతుంది.
    Experimental Example వేగవంతమైన విస్తరణ మరియు పొడవైన శకలాలు వేగంగా విస్తరించబడతాయి
    అత్తి 3. అల్ట్రా హైఫై 4 kb కంటే చిన్న శకలాలు 5 క్షణ/kb వరకు పొడిగించగలదు. పొడవైన శకలాలు కోసం, విస్తరణ సమయాన్ని తగిన విధంగా పొడిగించవచ్చు. 15 kb కంటే ఎక్కువ శకలాలు కోసం, పరిధి వేగం 30 సెకను/kb వరకు ఉంటుంది. M: TIANGEN D15000 మార్కర్
    Experimental Example Experimental Example Experimental Example బలమైన విశ్వవ్యాప్తం మరియు అధిక విశిష్టత, వివిధ మూలాల నుండి అధిక GC మరియు పొడవైన శకలాలు చదవడం సులభం
    చిత్రం 4. వివిధ రకాల టెంప్లేట్‌ల కోసం యాంప్లిఫికేషన్ సక్సెస్ రేట్ మరియు ఉత్పత్తి పరిమాణాన్ని నిర్ధారించడానికి అల్ట్రా హైఫై అధిక విశిష్టతను కలిగి ఉంది.
    A. అల్ట్రా హైఫై యాంప్లిఫికేషన్ ఫలితాలు
    B. సరఫరాదారు K యొక్క Hi-Fi ఎంజైమ్ విస్తరణ ఫలితాలు
    C. సరఫరాదారు N యొక్క హై-ఫై ఎంజైమ్ విస్తరణ ఫలితాలు
    M: TIANGEN D15000 మార్కర్
    లేన్ 1-5. విభిన్న పొడవు కలిగిన టెంప్లేట్‌ల విస్తరణ ఫలితాలు: 1. 750 bp; 2. 1 kb; 3.
    2 kb; 4. 4 kb; 5. 6 కెబి
    లేన్ 6. అధిక GC టెంప్లేట్ యొక్క విస్తరణ ఫలితం: 1915 bp (GC%: 70%);
    లేన్ 7-11. వివిధ జన్యువుల నుండి 2 kb టెంప్లేట్‌ల విస్తరణ ఫలితం: 7. ఎలుక; 8
    బియ్యం; 9. గోధుమ; 10. మొక్కజొన్న; 11. బాక్టీరియా;
    లేన్ 12-14. 8 kb లాంగ్ ఫ్రాగ్మెంట్ యాంప్లిఫికేషన్ ఫలితం: 12. బియ్యం; 13. మొక్కజొన్న;
    ప్ర: యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు లేవు

    A-1 మూస

    Temp టెంప్లేట్‌లో ప్రోటీన్ మలినాలు లేదా టాక్ ఇన్హిబిటర్‌లు మొదలైనవి ఉన్నాయి ——— DNA టెంప్లేట్‌ను శుద్ధి చేయండి, ప్రోటీన్ మలినాలను తొలగించండి లేదా టెంప్లేట్ DNA ని శుద్ధి కిట్‌లతో తీయండి.

    Temp టెంప్లేట్ డీనాటరేషన్ పూర్తి కాలేదు —— డీనాటరేషన్ ఉష్ణోగ్రతని తగిన విధంగా పెంచండి మరియు డీనాటరేషన్ సమయాన్ని పొడిగించండి.

    Mp మూస అధోకరణం ——టెంప్లేట్‌ను మళ్లీ సిద్ధం చేయండి.

    A-2 ప్రైమర్

    Pri ప్రైమర్‌ల నాణ్యత తక్కువగా ఉంది —— ప్రైమర్‌ను రీ-సింథసైజ్ చేయండి.

    Mer ప్రైమర్ క్షీణత —— సంరక్షణ కోసం అధిక సాంద్రత గల ప్రైమర్‌లను చిన్న వాల్యూమ్‌గా మార్చండి. బహుళ గడ్డకట్టడం మరియు కరిగించడం లేదా దీర్ఘకాలిక 4 ° C క్రియోప్రెజర్డ్‌ను నివారించండి.

    Pri ప్రైమర్‌ల యొక్క సరికాని డిజైన్ (ఉదా. ప్రైమర్ పొడవు సరిపోదు, ప్రైమర్‌ల మధ్య డైమర్ ఏర్పడుతుంది, మొదలైనవి) -రీడిజైన్ ప్రైమర్‌లు (ప్రైమర్ డైమర్ మరియు సెకండరీ స్ట్రక్చర్ ఏర్పడకుండా ఉండండి)

    A-3 Mg2+ఏకాగ్రత

    G Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా తక్కువ —— Mg ని సరిగ్గా పెంచండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.

    A-4 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత

    An అధిక ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత ప్రైమర్ మరియు టెంప్లేట్ యొక్క బైండింగ్‌ను ప్రభావితం చేస్తుంది. —— ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను తగ్గించండి మరియు 2 ° C ప్రవణతతో పరిస్థితిని ఆప్టిమైజ్ చేయండి.

    A-5 పొడిగింపు సమయం

    Extension చిన్న పొడిగింపు సమయం —— పొడిగింపు సమయాన్ని పెంచండి.

    ప్ర: తప్పుడు పాజిటివ్

    దృగ్విషయం: ప్రతికూల నమూనాలు కూడా లక్ష్య శ్రేణి బ్యాండ్‌లను చూపుతాయి.

    A-1 PCR కాలుష్యం

    Target టార్గెట్ సీక్వెన్స్ లేదా యాంప్లిఫికేషన్ ప్రొడక్ట్స్ యొక్క క్రాస్ కాలుష్యం —— నెగటివ్ శాంపిల్‌లో టార్గెట్ సీక్వెన్స్ ఉన్న శాంపిల్‌ని జాగ్రత్తగా పైప్ చేయవద్దు లేదా సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్ నుండి బయటకు పోయకూడదు. ఇప్పటికే ఉన్న న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను తొలగించడానికి కారకాలు లేదా పరికరాలు ఆటోక్లేవ్ చేయబడాలి మరియు ప్రతికూల నియంత్రణ ప్రయోగాల ద్వారా కాలుష్యం ఉనికిని గుర్తించాలి.

    Ag కారక కాలుష్యం —— కారకాలను అరికట్టండి మరియు తక్కువ ఉష్ణోగ్రత వద్ద నిల్వ చేయండి.

    A-2 ప్రైమ్r

    G Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా తక్కువ —— Mg ని సరిగ్గా పెంచండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.

    Pri సరికాని ప్రైమర్ డిజైన్, మరియు టార్గెట్ సీక్వెన్స్‌లో టార్గెట్ కాని సీక్వెన్స్‌తో హోమోలజీ ఉంటుంది. —— రీ-డిజైన్ ప్రైమర్‌లు.

    ప్ర: నాన్-స్పెసిఫిక్ యాంప్లిఫికేషన్

    దృగ్విషయం: పిసిఆర్ యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు ఆశించిన పరిమాణంతో పెద్దవిగా లేదా చిన్నవిగా లేదా కొన్నిసార్లు నిర్దిష్ట యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు మరియు నాన్-స్పెసిఫిక్ యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు ఏర్పడతాయి.

    A-1 ప్రైమర్

    Pri పేలవమైన ప్రైమర్ నిర్దిష్టత

    —— రీ-డిజైన్ ప్రైమర్.

    Mer ప్రైమర్ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— డీనాటరేషన్ ఉష్ణోగ్రతని సరిగ్గా పెంచండి మరియు డీనాటరేషన్ సమయాన్ని పొడిగించండి.

    A-2 Mg2+ ఏకాగ్రత

    Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— Mg2+ ఏకాగ్రతను సరిగ్గా తగ్గించండి: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.

    A-3 థర్మోస్టేబుల్ పాలిమరేస్

    En అధిక ఎంజైమ్ మొత్తం —— 0.5 U యొక్క వ్యవధిలో ఎంజైమ్ మొత్తాన్ని తగిన విధంగా తగ్గించండి.

    A-4 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత

    Ne ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత చాలా తక్కువగా ఉంది ——అనేలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను సముచితంగా పెంచండి లేదా రెండు-దశల ఎనియలింగ్ పద్ధతిని అవలంబించండి

    A-5 PCR చక్రాలు

    P చాలా ఎక్కువ PCR చక్రాలు —— PCR చక్రాల సంఖ్యను తగ్గించండి.

    ప్ర: పాచీ లేదా స్మెర్ బ్యాండ్‌లు

    A-1 ప్రైమర్——Por ప్రత్యేకత —— ప్రైమర్‌ని రీ-డిజైన్ చేయండి, ప్రైమర్ యొక్క విశిష్టతను పెంచడానికి ప్రైమర్ యొక్క స్థానం మరియు పొడవును మార్చండి; లేదా సమూహ PCR నిర్వహించండి.

    A-2 మూస DNA

    —— టెంప్లేట్ స్వచ్ఛమైనది కాదు —— టెంప్లేట్‌ను శుద్ధి చేయండి లేదా డిఎన్‌ఎను ప్యూరిఫికేషన్ కిట్‌లతో సేకరించండి.

    A-3 Mg2+ ఏకాగ్రత

    ——Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— Mg ని సరిగ్గా తగ్గించండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.

    A-4 dNTP

    —— dNTP ల సాంద్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— dNTP గాఢతను తగిన విధంగా తగ్గించండి

    A-5 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత

    —— చాలా తక్కువ ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత ——అనేలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను తగిన విధంగా పెంచండి

    A-6 సైకిల్స్

    —— చాలా చక్రాలు —— చక్రం సంఖ్యను ఆప్టిమైజ్ చేయండి

    ప్ర: 50 μl పిసిఆర్ రియాక్షన్ సిస్టమ్‌లో డిఎన్‌ఎ ఎంత టెంప్లేట్ జోడించాలి?
    ytry
    ప్ర: పొడవైన శకలాలు ఎలా విస్తరించాలి?

    మొదటి దశ తగిన పాలిమరేస్‌ని ఎంచుకోవడం. రెగ్యులర్ టాక్ పాలిమరేస్ 3'-5 'ఎక్సోన్యూకలీస్ కార్యాచరణ లేకపోవడం వల్ల ప్రూఫ్ రీడ్ చేయబడదు, మరియు అసమతుల్యత శకలాల పొడిగింపు సామర్థ్యాన్ని బాగా తగ్గిస్తుంది. అందువల్ల, రెగ్యులర్ టాక్ పాలిమరేస్ 5 kb కంటే పెద్ద లక్ష్య శకలాలను సమర్థవంతంగా విస్తరించదు. పొడిగింపు సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరచడానికి మరియు పొడవైన శకలం విస్తరణ అవసరాలను తీర్చడానికి ప్రత్యేక సవరణ లేదా ఇతర అధిక విశ్వసనీయత కలిగిన పాలిమరేస్‌తో టాక్ పాలిమరేస్‌ను ఎంచుకోవాలి. అదనంగా, పొడవైన శకలాలు విస్తరణకు కూడా ప్రైమర్ డిజైన్, డీనాటరేషన్ సమయం, ఎక్స్‌టెన్షన్ టైమ్, బఫర్ పిహెచ్, మొదలైన వాటికి సర్దుబాటు అవసరం. సాధారణంగా, 18-24 బిపి ఉన్న ప్రైమర్‌లు మెరుగైన దిగుబడికి దారితీస్తాయి. టెంప్లేట్ నష్టాన్ని నివారించడానికి, 94 ° C వద్ద డీనాటరేషన్ సమయం 30 సెకనులకు లేదా ప్రతి చక్రానికి తక్కువగా తగ్గించబడాలి మరియు విస్తరణకు ముందు ఉష్ణోగ్రత 94 ° C కి పెరిగే సమయం 1 నిమిషం కన్నా తక్కువ ఉండాలి. అంతేకాకుండా, పొడిగింపు ఉష్ణోగ్రతను సుమారు 68 ° C వద్ద సెట్ చేయడం మరియు 1 kb/min రేటు ప్రకారం పొడిగింపు సమయాన్ని రూపొందించడం వలన పొడవాటి శకలాలు సమర్థవంతంగా విస్తరించడాన్ని నిర్ధారించవచ్చు.

    ప్ర: పిసిఆర్ యొక్క యాంప్లిఫికేషన్ విశ్వసనీయతను ఎలా మెరుగుపరచాలి?

    అధిక విశ్వసనీయత కలిగిన వివిధ DNA పాలిమరేస్‌లను ఉపయోగించడం ద్వారా PCR యాంప్లిఫికేషన్ యొక్క లోపం రేటును తగ్గించవచ్చు. ఇప్పటివరకు కనుగొనబడిన అన్ని టాక్ DNA పాలిమరేస్‌లలో, Pfu ఎంజైమ్ తక్కువ లోపం రేటు మరియు అత్యధిక విశ్వసనీయతను కలిగి ఉంది (జోడించిన పట్టిక చూడండి). ఎంజైమ్ ఎంపికతో పాటు, బఫర్ కూర్పును ఆప్టిమైజ్ చేయడం, థర్మోస్టేబుల్ పాలిమరేస్ ఏకాగ్రత మరియు PCR సైకిల్ నంబర్‌ను ఆప్టిమైజ్ చేయడం వంటి ప్రతిచర్య పరిస్థితులను ఆప్టిమైజ్ చేయడం ద్వారా పరిశోధకులు PCR మ్యుటేషన్ రేటును మరింత తగ్గించవచ్చు.

    మీ సందేశాన్ని ఇక్కడ వ్రాసి మాకు పంపండి