2 × టాక్ పిసిఆర్ మాస్టర్‌మిక్స్ Ⅱ
లక్షణాలు
Amp అధిక విస్తరణ సామర్థ్యం: వివిధ పరిమాణాల DNA శకలాలు (5 kb కంటే తక్కువ) మరియు మూలాలను సమర్ధవంతంగా విస్తరించవచ్చు.
Sens అధిక సున్నితత్వం: జన్యుపరమైన టెంప్లేట్‌ల నుండి 10 pg కంటే తక్కువ లక్ష్య శకలాలు విస్తరించబడతాయి.
Stress అధిక ఒత్తిడి నిరోధకత: కఠినమైన-వెలికితీసిన టెంప్లేట్/బ్యాక్టీరియా సంస్కృతి వంటి అధిక అపరిశుభ్రత కలిగిన టెంప్లేట్‌ల కోసం, లక్ష్య భాగాన్ని సులభంగా విస్తరించవచ్చు. పాలిమరేస్ కార్యాచరణ పదేపదే గడ్డకట్టడం మరియు కరిగించడం ద్వారా ప్రభావితం కాదు.
Applications అప్లికేషన్‌లకు అనుకూలమైనది: రియాక్షన్ సిస్టమ్ సులభంగా మరియు త్వరగా తయారు చేయబడింది. విస్తరించిన శకలంలో 3 ′ ముగింపు dA- ఓవర్‌హాంగ్ ఉంది, ఇది TA క్లోనింగ్‌కు సౌకర్యంగా ఉంటుంది.
స్పెసిఫికేషన్
రకం: టాక్ DNA పాలిమరేస్
నమూనా: శుద్ధి చేయబడిన/కఠినమైన-వెలికితీసిన టెంప్లేట్/బ్యాక్టీరియా సంస్కృతి
మూస: > 10 పేజీలు
ముక్క పరిమాణం: <5 kb
అప్లికేషన్స్: DNA శకలాల PCR విస్తరణ, DNA లేబులింగ్, ప్రైమర్ పొడిగింపు, సీక్వెన్స్ డిటర్మినేషన్, పెద్ద-స్థాయి జన్యు గుర్తింపు, సెమీ-క్వాంటిటేటివ్ PCR ప్రయోగాలు, ట్రేస్ DNA ని గుర్తించడం మొదలైనవి.
అన్ని ఉత్పత్తులను ODM/OEM కోసం అనుకూలీకరించవచ్చు. వివరాల కోసం,దయచేసి అనుకూలీకరించిన సేవ (ODM/OEM) పై క్లిక్ చేయండి
 |
చిత్రం 1. రియాజెంట్‌ల ఒత్తిడి నిరోధకతను గుర్తించడానికి డిఫరెంట్ సోర్స్‌ల టెంప్లేట్లు వరుసగా TIANGEN టాక్ మాస్టర్‌మిక్స్ II మరియు సప్లయర్ TR నుండి సాధారణ టాక్ మిక్స్ ద్వారా విస్తరించబడ్డాయి. ముడి జెనోమిక్ టెంప్లేట్లు మరియు బ్యాక్టీరియా సంస్కృతి నుండి TIANGEN ఉత్పత్తులు లక్ష్య శకలాలను విస్తరించగలవని ఫలితాలు చూపుతున్నాయి మరియు సరఫరా నిరోధకం కంటే ఒత్తిడి నిరోధకత మెరుగ్గా ఉంటుంది. A: TIANGEN TIANcombi DNA Lyse & Det PCR కిట్ ద్వారా సేకరించిన క్రూడ్ జెనోమిక్ టెంప్లేట్. Prp/DN: క్రూడ్ వెలికితీత మరియు మానవ రక్త నమూనాలను గుర్తించడం. బియ్యం: ముడి వెలికితీత మరియు బియ్యం నమూనాలను గుర్తించడం. బి: కాలనీ పిసిఆర్. PCR భాగం 700 bp. M: TIANGEN మార్కర్ III |
 |
విభిన్న మూలాల నుండి మరియు వివిధ పొడవులతో ఉన్న టెంప్లేట్‌లకు మంచి విశ్వవ్యాప్తం చిత్రం 2. TIANGEN ని ఉపయోగించి వివిధ మూలాలు మరియు పొడవుల శకలాలు విస్తరించబడ్డాయి టాక్ మాస్టర్‌మిక్స్ II (A) మరియు సాధారణమైనది టాక్ సరఫరాదారు TK (B), సరఫరాదారు TR (C), సరఫరాదారు V (D) మరియు సరఫరాదారు G (E) వరుసగా కలపండి. TIANGEN ఉత్పత్తుల సమగ్ర పనితీరు యాంప్లిఫికేషన్ సామర్ధ్యం, విశిష్టత మరియు సార్వత్రికత పరంగా ఉత్తమమైనది అని ఫలితాలు చూపుతున్నాయి. M: TIANGEN మార్కర్ III1: సోయాబీన్ జెనోమిక్ DNA టెంప్లేట్ (120 bp); 2-3: రైస్ జెనోమిక్ DNA టెంప్లేట్ (694 bp, 2258 bp); 4: కాటన్ జెనోమిక్ DNA టెంప్లేట్ (200 bp); 5: ఎస్చెరిచియా కోలి జన్యుసంబంధమైన DNA టెంప్లేట్ (2298 bp); 6-7: మౌస్ జీనోమ్ DNA టెంప్లేట్ (1 kb, 2 kb); 8-10: ఎలుక జన్యుసంబంధమైన DNA టెంప్లేట్ (1 kb, 2 kb, 2080 bp); 11-18: మానవ జన్యు DNA DNA టెంప్లేట్ (300 bp, 448 bp (GC%: 74.8%), 1100 bp, 750 bp, 1000 bp, 1090 bp (GC%: 70.4%), 2 kb, 4 kb) |
 |
అధిక సున్నితత్వం చిత్రం 3. ఎలుక మరియు మానవ DNA శకలాలు వివిధ సాంద్రతలు TIANGEN ఉపయోగించి విస్తరించబడ్డాయి టాక్ మాస్టర్‌మిక్స్ II (A), సాధారణమైనది టాక్ విస్తరణ సున్నితత్వాన్ని గుర్తించడానికి వరుసగా సరఫరాదారు V (B) మరియు సరఫరాదారు TK (C) మిశ్రమం. TIANGEN ఉత్పత్తి 0.01 ng కంటే తక్కువ జీనోమ్ టెంప్లేట్ నుండి లక్ష్య భాగాన్ని విస్తరించగలదని ఫలితాలు చూపుతున్నాయి మరియు సరఫరాదారు V మరియు TKM నుండి ఉత్పత్తుల కంటే దాని సున్నితత్వం మెరుగ్గా ఉంటుంది: TIANGEN మార్కర్ III, N: NTCTemplate ఇన్‌పుట్ 1-8 : 200 ng, 100 ng, 50 ng, 20 ng, 10 ng, 1 ng, 0.1 ng, 0.01 ng. |
A-1 మూస
Temp టెంప్లేట్‌లో ప్రోటీన్ మలినాలు లేదా టాక్ ఇన్హిబిటర్‌లు మొదలైనవి ఉన్నాయి ——— DNA టెంప్లేట్‌ను శుద్ధి చేయండి, ప్రోటీన్ మలినాలను తొలగించండి లేదా టెంప్లేట్ DNA ని శుద్ధి కిట్‌లతో తీయండి.
Temp టెంప్లేట్ డీనాటరేషన్ పూర్తి కాలేదు —— డీనాటరేషన్ ఉష్ణోగ్రతని తగిన విధంగా పెంచండి మరియు డీనాటరేషన్ సమయాన్ని పొడిగించండి.
Mp మూస అధోకరణం ——టెంప్లేట్‌ను మళ్లీ సిద్ధం చేయండి.
A-2 ప్రైమర్
Pri ప్రైమర్‌ల నాణ్యత తక్కువగా ఉంది —— ప్రైమర్‌ను రీ-సింథసైజ్ చేయండి.
Mer ప్రైమర్ క్షీణత —— సంరక్షణ కోసం అధిక సాంద్రత గల ప్రైమర్‌లను చిన్న వాల్యూమ్‌గా మార్చండి. బహుళ గడ్డకట్టడం మరియు కరిగించడం లేదా దీర్ఘకాలిక 4 ° C క్రియోప్రెజర్డ్‌ను నివారించండి.
Pri ప్రైమర్‌ల యొక్క సరికాని డిజైన్ (ఉదా. ప్రైమర్ పొడవు సరిపోదు, ప్రైమర్‌ల మధ్య డైమర్ ఏర్పడుతుంది, మొదలైనవి) -రీడిజైన్ ప్రైమర్‌లు (ప్రైమర్ డైమర్ మరియు సెకండరీ స్ట్రక్చర్ ఏర్పడకుండా ఉండండి)
A-3 Mg2+ఏకాగ్రత
G Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా తక్కువ —— Mg ని సరిగ్గా పెంచండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.
A-4 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత
An అధిక ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత ప్రైమర్ మరియు టెంప్లేట్ యొక్క బైండింగ్‌ను ప్రభావితం చేస్తుంది. —— ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను తగ్గించండి మరియు 2 ° C ప్రవణతతో పరిస్థితిని ఆప్టిమైజ్ చేయండి.
A-5 పొడిగింపు సమయం
Extension చిన్న పొడిగింపు సమయం —— పొడిగింపు సమయాన్ని పెంచండి.
దృగ్విషయం: ప్రతికూల నమూనాలు కూడా లక్ష్య శ్రేణి బ్యాండ్‌లను చూపుతాయి.
A-1 PCR కాలుష్యం
Target టార్గెట్ సీక్వెన్స్ లేదా యాంప్లిఫికేషన్ ప్రొడక్ట్స్ యొక్క క్రాస్ కాలుష్యం —— నెగటివ్ శాంపిల్‌లో టార్గెట్ సీక్వెన్స్ ఉన్న శాంపిల్‌ని జాగ్రత్తగా పైప్ చేయవద్దు లేదా సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్ నుండి బయటకు పోయకూడదు. ఇప్పటికే ఉన్న న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను తొలగించడానికి కారకాలు లేదా పరికరాలు ఆటోక్లేవ్ చేయబడాలి మరియు ప్రతికూల నియంత్రణ ప్రయోగాల ద్వారా కాలుష్యం ఉనికిని గుర్తించాలి.
Ag కారక కాలుష్యం —— కారకాలను అరికట్టండి మరియు తక్కువ ఉష్ణోగ్రత వద్ద నిల్వ చేయండి.
A-2 ప్రైమ్r
G Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా తక్కువ —— Mg ని సరిగ్గా పెంచండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.
Pri సరికాని ప్రైమర్ డిజైన్, మరియు టార్గెట్ సీక్వెన్స్‌లో టార్గెట్ కాని సీక్వెన్స్‌తో హోమోలజీ ఉంటుంది. —— రీ-డిజైన్ ప్రైమర్‌లు.
దృగ్విషయం: పిసిఆర్ యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు ఆశించిన పరిమాణంతో పెద్దవిగా లేదా చిన్నవిగా లేదా కొన్నిసార్లు నిర్దిష్ట యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు మరియు నాన్-స్పెసిఫిక్ యాంప్లిఫికేషన్ బ్యాండ్‌లు ఏర్పడతాయి.
A-1 ప్రైమర్
Pri పేలవమైన ప్రైమర్ నిర్దిష్టత
—— రీ-డిజైన్ ప్రైమర్.
Mer ప్రైమర్ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— డీనాటరేషన్ ఉష్ణోగ్రతని సరిగ్గా పెంచండి మరియు డీనాటరేషన్ సమయాన్ని పొడిగించండి.
A-2 Mg2+ ఏకాగ్రత
Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— Mg2+ ఏకాగ్రతను సరిగ్గా తగ్గించండి: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.
A-3 థర్మోస్టేబుల్ పాలిమరేస్
En అధిక ఎంజైమ్ మొత్తం —— 0.5 U యొక్క వ్యవధిలో ఎంజైమ్ మొత్తాన్ని తగిన విధంగా తగ్గించండి.
A-4 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత
Ne ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత చాలా తక్కువగా ఉంది ——అనేలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను సముచితంగా పెంచండి లేదా రెండు-దశల ఎనియలింగ్ పద్ధతిని అవలంబించండి
A-5 PCR చక్రాలు
P చాలా ఎక్కువ PCR చక్రాలు —— PCR చక్రాల సంఖ్యను తగ్గించండి.
A-1 ప్రైమర్——Por ప్రత్యేకత —— ప్రైమర్‌ని రీ-డిజైన్ చేయండి, ప్రైమర్ యొక్క విశిష్టతను పెంచడానికి ప్రైమర్ యొక్క స్థానం మరియు పొడవును మార్చండి; లేదా సమూహ PCR నిర్వహించండి.
A-2 మూస DNA
—— టెంప్లేట్ స్వచ్ఛమైనది కాదు —— టెంప్లేట్‌ను శుద్ధి చేయండి లేదా డిఎన్‌ఎను ప్యూరిఫికేషన్ కిట్‌లతో సేకరించండి.
A-3 Mg2+ ఏకాగ్రత
——Mg2+ ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— Mg ని సరిగ్గా తగ్గించండి2+ ఏకాగ్రత: Mg ని ఆప్టిమైజ్ చేయండి2+ సరైన Mg ని నిర్ణయించడానికి 0.5 mM విరామంతో 1 mM నుండి 3 mM వరకు ప్రతిచర్యల శ్రేణి ద్వారా ఏకాగ్రత2+ ప్రతి టెంప్లేట్ మరియు ప్రైమర్ కోసం ఏకాగ్రత.
A-4 dNTP
—— dNTP ల సాంద్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంది —— dNTP గాఢతను తగిన విధంగా తగ్గించండి
A-5 ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత
—— చాలా తక్కువ ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత ——అనేలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను తగిన విధంగా పెంచండి
A-6 సైకిల్స్
—— చాలా చక్రాలు —— చక్రం సంఖ్యను ఆప్టిమైజ్ చేయండి
మొదటి దశ తగిన పాలిమరేస్‌ని ఎంచుకోవడం. రెగ్యులర్ టాక్ పాలిమరేస్ 3'-5 'ఎక్సోన్యూకలీస్ కార్యాచరణ లేకపోవడం వల్ల ప్రూఫ్ రీడ్ చేయబడదు, మరియు అసమతుల్యత శకలాల పొడిగింపు సామర్థ్యాన్ని బాగా తగ్గిస్తుంది. అందువల్ల, రెగ్యులర్ టాక్ పాలిమరేస్ 5 kb కంటే పెద్ద లక్ష్య శకలాలను సమర్థవంతంగా విస్తరించదు. పొడిగింపు సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరచడానికి మరియు పొడవైన శకలం విస్తరణ అవసరాలను తీర్చడానికి ప్రత్యేక సవరణ లేదా ఇతర అధిక విశ్వసనీయత కలిగిన పాలిమరేస్‌తో టాక్ పాలిమరేస్‌ను ఎంచుకోవాలి. అదనంగా, పొడవైన శకలాలు విస్తరణకు కూడా ప్రైమర్ డిజైన్, డీనాటరేషన్ సమయం, ఎక్స్‌టెన్షన్ టైమ్, బఫర్ పిహెచ్, మొదలైన వాటికి సర్దుబాటు అవసరం. సాధారణంగా, 18-24 బిపి ఉన్న ప్రైమర్‌లు మెరుగైన దిగుబడికి దారితీస్తాయి. టెంప్లేట్ నష్టాన్ని నివారించడానికి, 94 ° C వద్ద డీనాటరేషన్ సమయం 30 సెకనులకు లేదా ప్రతి చక్రానికి తక్కువగా తగ్గించబడాలి మరియు విస్తరణకు ముందు ఉష్ణోగ్రత 94 ° C కి పెరిగే సమయం 1 నిమిషం కన్నా తక్కువ ఉండాలి. అంతేకాకుండా, పొడిగింపు ఉష్ణోగ్రతను సుమారు 68 ° C వద్ద సెట్ చేయడం మరియు 1 kb/min రేటు ప్రకారం పొడిగింపు సమయాన్ని రూపొందించడం వలన పొడవాటి శకలాలు సమర్థవంతంగా విస్తరించడాన్ని నిర్ధారించవచ్చు.
అధిక విశ్వసనీయత కలిగిన వివిధ DNA పాలిమరేస్‌లను ఉపయోగించడం ద్వారా PCR యాంప్లిఫికేషన్ యొక్క లోపం రేటును తగ్గించవచ్చు. ఇప్పటివరకు కనుగొనబడిన అన్ని టాక్ DNA పాలిమరేస్‌లలో, Pfu ఎంజైమ్ తక్కువ లోపం రేటు మరియు అత్యధిక విశ్వసనీయతను కలిగి ఉంది (జోడించిన పట్టిక చూడండి). ఎంజైమ్ ఎంపికతో పాటు, బఫర్ కూర్పును ఆప్టిమైజ్ చేయడం, థర్మోస్టేబుల్ పాలిమరేస్ ఏకాగ్రత మరియు PCR సైకిల్ నంబర్‌ను ఆప్టిమైజ్ చేయడం వంటి ప్రతిచర్య పరిస్థితులను ఆప్టిమైజ్ చేయడం ద్వారా పరిశోధకులు PCR మ్యుటేషన్ రేటును మరింత తగ్గించవచ్చు.
ఉత్పత్తుల వర్గాలు
మమ్మల్ని ఎందుకు ఎంచుకున్నావు
ఇది స్థాపించబడినప్పటి నుండి, మా ఫ్యాక్టరీ సూత్రానికి కట్టుబడి మొదటి ప్రపంచ స్థాయి ఉత్పత్తులను అభివృద్ధి చేస్తోంది
మొదటి నాణ్యత. మా ఉత్పత్తులు పరిశ్రమలో అద్భుతమైన ఖ్యాతిని పొందాయి మరియు కొత్త మరియు పాత కస్టమర్‌ల మధ్య విలువైన విశ్వసనీయతను పొందాయి.
- టెల్: +86 010-59822688
- బిల్డింగ్ 5, నం. 86, షువాంగింగ్ వెస్ట్ రోడ్, చాంగ్పింగ్ జిల్లా, బీజింగ్.
- people@tiangen.com
